Skillnad mellan nitrocellulosa och nylonmembran

De huvudskillnad mellan nitrocellulosa och nylonmembran är det nitrocellulosamembran har en hög affinitet för proteinbindning medan nylonmembranet har en hög affinitet för nukleinsyrabindning. Vidare binder hydrofoba och elektrostatiska interaktioner makromolekyler till nitrocellulosemembran medan joniska, hydrofoba och elektrostatiska interaktioner binder makromolekyler till nylonmembranen

Nitrocellulosa och nylonmembran är två typer av membran till vilka makromolekylerna överförs från gelén. Nitrocellulosamembran kan emellertid användas för att binda DNA och RNA också.

Viktiga områden som omfattas

1. Vad är ett nitrocellulosamembran
     - Definition, struktur, bindningsmekanism, fördelar 
2. Vad är en nylonmembran
     - Definition, struktur, bindningsmekanism, fördelar 
3. Vad är likheterna mellan nitrocellulosa och nylonmembran
     - Översikt över gemensamma funktioner
4. Vad är skillnaden mellan nitrocellulosa och nylonmembran
     - Jämförelse av viktiga skillnader

Nyckelbegrepp

Affinity, Biodyne A, Biodyne B, Nitrocellulosa, Nukleinsyra, Nylon, Porstorlek, Proteiner

Vad är ett nitrocellulosamembran

Nitrocellulosamembran är en vanlig matris som används vid Western blotting på grund av den höga proteinbindande affiniteten. Det kan emellertid användas för att detektera nukleinsyror förutom immobiliserade proteiner och glykoproteiner. Immobiliseringen av makromolekylerna sker huvudsakligen genom hydrofoba interaktioner. Vätebindningar bildas också mellan nitrogrupperna i membranet och proteinernas aminosyrasidokedjor. Proteinimmobilisering kommer att vara hög i koncentrationerna med hög salt och låg metanol.

Figur 1: Blotprincipen

Nitrocellulosa membran finns i 100% rena former av nitrocellulosa med en hög yta, som är likformig. De tillgängliga förstorlekarna är 0,2 μm och 0,45 um. Den lilla porstorleken är bättre för bindningen med små proteiner (<14 kDa). The binding and retaining capacity of proteins is 80-250 μg/cm². De förmonterade membranerna är klara att använda. En av de främsta fördelarna med nitrocellulosamembran är dess mycket låga bakgrund eftersom det lätt kan blockeras. De stödda nitrocellulosemembranen kan avlägsnas och reproveras.

Vad är en nylonmembran

Nylonmembran är en allmänt använd matris för bindning av nukleinsyror. Nylonmembran är mekaniskt starka än nitrocellulosamembran. De två huvudtyperna av nylonmembran som används vid blottning är Biodyne A och Biodyne B. Porstorleken hos båda typerna är 0,45 um. De är resistenta mot värme och lösningsmedel. Dessutom kommer de inte att krympa, spricka eller riva. Båda ger en låg bakgrund än nitrocellulosamembran.

Figur 2: Southern Blot Membrane

• Biodyne A består av omodifierad nylon 66. Hög känslighet och utmärkt upplösning är fördelarna med Biodyne A. Eftersom Biodyne A innehåller både positiva och negativa laddningar kan den användas för att binda många typer av makromolekyler.
• Biodyne B består av positivt laddad nylon 66. Därför har den en utmärkt bindningskapacitet för negativt laddade nukleinsyror, såsom DNA och RNA.

Likheter mellan nitrocellulosa och nylonmembran

• Nitrocellulosa och nylonmembran är två typer av membran som används för att överföra makromolekyler från gelén i blottingstekniker.
• De tillåter detektion av makromolekyler på membranet.
• Båda typerna av membran kan användas för att överföra nukleinsyror.
• De kan strippas och reprobedas.

Skillnad mellan nitrocellulosa och nylonmembran

Definition

Nitrocellulosamembran avser ett klibbigt membran som används för immobilisering av nukleinsyror och proteiner vid blottning medan nylonmembran hänför sig till en typ av membran med hög hållfasthet och värmebeständighet som används för att immobilisera makromolekyler.

Gjord av

Nitrocellulosa membran består av nitrerad cellulosa medan nylon membran består av omodifierad eller positivt laddad Biodyne A och Biodyne B nylon.

Porstorlek

Porstorleken av nitrocellulosemembran är 0,2 um och 0,45 um medan porstorleken hos nylonmembranema är 0,45 um.

Styrka

Nitrocellulosemembran är sköra och är således inte återanvändbara medan nylonmembran är mekaniskt starka.

Överföringsmetod

Elektroforetisk överföring används huvudsakligen vid överföring av proteiner till nitrocellulosamembran medan kapilläröverföring är vanligt med nylonmembran.

Affinitet

Nitrocellulosa membraner har en hög affinitet till protein medan nylonmembran har hög affinitet mot nukleinsyror. Nitrocellulosa membran kan också användas för nukleinsyror.

läsk

Nitrocellulosa membraner är bättre för Western blotting medan nylon membran är bättre för Southern och Northern Blotting.

Bindande interaktioner

Hydrofoba och elektrostatiska interaktioner binder makromolekyler till nitrocellulosemembran medan joniska, hydrofoba och elektrostatiska interaktioner binder makromolekyler till nylonmembranen.

Proteinbindande kapacitet

Den proteinbindande förmågan hos nitrocellulosamembran är 80-250 μg / cm² medan nylonmembranets proteinbindningsförmåga är 150-200 μg / cm².

Slutsats

Nitrocellulosa membran är ett skört membran som huvudsakligen används för att immobilisera protein i Western blotting medan nylonmembran är ett starkt membran som huvudsakligen används för att immobilisera nukleinsyror. Nitrocellulosamembranerna binder molekyler genom hydrofoba interaktioner medan nylonmembranen binder molekyler genom elektrostatiska interaktioner. Därför är huvudskillnaden mellan nitrocellulosa och nylonmembran affiniteten.

Referens:

1. "Nitrocellulosa Membranes for Western Blotting" Thermo Fisher Scientific - LK. "Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, tillgänglig här
2. "Biodyne A Nylon Membrane, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, tillgänglig här
3. "Biodyne B Nylon Membran, 0,45 m, 8 Cm x 12 Cm." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, tillgänglig här

Image Courtesy:

1. "Blot biology" Av Gbdivers - eget arbete (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Southern blot membran" Av Bojan Žunar - Egent arbete (CC BY-SA 4.0) via Commons Wikimedia