Hur man beräknar Rf-värden för TLC

Rf-värdet är kvarhållningsfaktorn som används vid identifiering av organiska föreningar i en blandning. Rf-värdet beräknas genom mätning av det relativa avståndet som reste av en viss organisk förening i förhållande till mobilfasen. Den beräknas både i papperskromatografi och TLC.

Tunnskiktskromatografi (TLC) är en separationsmetod som är inblandad i separation av två eller flera organiska föreningar genom deras fördelning mellan fasta och flytande faser. Den stationära (fasta) fasen är en polär substans i TLC medan den mobila (flytande) fasen är en enda eller en kombination av lösningsmedel. Absorbenten är belagd som ett tunt skikt i en glasskiva. De organiska föreningarna separeras genom manipulering av den mobila fasen.

Viktiga områden som omfattas

1. Vad är TLC
      - Definition, princip, användningar
2. Hur man beräknar Rf-värden för TLC
     - Beräkning av Rf-värde

Nyckelord: Mobilfas, Mobilitet, Rf-värde, Stationär fas, Separation, Tunnskiktskromatografi (TLC)

Vad är TLC

TLC är en kromatografisteknik som är ansvarig för separation av organiska föreningar på en blandning baserat på deras relativa rörlighet. Den använder en fast stationär fas som består av en polär absorberande och en flytande mobil fas som består av en enda eller en blandning av organiska lösningsmedel. Det polära absorberingsmedlet kan vara antingen finmalt aluminiumoxid eller kiseldioxidpartiklar. Separering av svart bläck med TLC visas i Figur 1.

Figur 1: TLC av svart bläck

De organiska föreningarna och mobilfasen rör sig över den stationära fasen på grund av kapillärverkan. Differensiell rörlighet för organiska föreningar uppnås genom föreningarnas relativa affinitet i förhållande till den stationära fasen och mobilfasen. Föreningarna med en högre affinitet mot den stationära fasen rör sig långsamt, eftersom den stationära fasen bibehåller de organiska föreningarna. Eftersom stationär fas är polär i TLC rör sig polära föreningar långsamt. Föreningar med högre affinitet mot mobilfasen rör sig emellertid snabbare genom den stationära fasen. Den mobila fasen är icke-polär och icke-polära organiska föreningar, som har mindre affinitet mot den stationära fasen, rör sig snabbare genom den stationära fasen. Individuella föreningar kan visualiseras som fläckar efter separationen.

TLC används i:

1. Bestämningen av antalet föreningar i en blandning
2. Verifiering av blandningen av en blandning
3. Bestämning av lämpliga betingelser för kolonnkromatografi
4. Analysera fraktionerna erhållna från kolonnkromatografi

Hur man beräknar Rf-värden för TLC

Rf-värdet är det relativa avståndet som reste av en viss förening i förhållande till mobilfasen. Det kan beräknas med följande ekvation.

Figur 2: Beräkning av Rf-värde

Rf = Distans reste av föreningen (a) / Distans reste av lösningsmedelsfronten (b)

Rf-värdet kallas också förhållandet-framåt. Under bestämda betingelser för stationär fas, mobil fas och temperaturen är Rf-värdet för en viss organisk förening ett konstant värde. Emellertid kan olika organiska föreningar med liknande polaritet ha liknande Rf-värden. Därför kan andra egenskaper hos organiska föreningar såsom färg på TLC-plattan användas under identifieringen av föreningen.

Slutsats

TLC är en kromatografiteknik som används vid separation av organiska föreningar baserat på deras polaritet. Differenspolariteten hos dessa föreningar möjliggör differentiell rörlighet genom den stationära fasen av TLC. Rf-värdet är den relativa rörligheten för en viss organisk förening med avseende på mobilfasen. Det beräknas genom att mäta relativa avstånd som räknas av de organiska föreningarna.

Referens:

1. "Tunnskiktskromatografi (TLC): Princip och procedur." Owlcation, 29 december 2015, Tillgänglig här.

Image Courtesy: 

1. "TLC svart bläck" Av Den ursprungliga uppladdaren var Natrij på English Wikipedia - Överförd från en.wikipedia till Commons (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Factor de retenció diagram" Av Cathan - Egent arbete (Public Domain) via Commons Wikimedia