Centrifugering är en separationsmetod där appliceringen av centrifugalkraften sedimenterar eller fraktionerar en heterogen blandning. Mikrocentrifugering, centrifugering med hög hastighet och ultracentrifugering är de tre typerna av centrifugering baserat på volymen och hastigheten som används i processen. Bland andra centrifugeringsmetoder använder ultracentrifugering maximal vinkelhastighet. Rotationshastigheten för ultracentrifugering är så hög som 1 000 000 g. Sålunda används ultracentrifugering för att isolera små partiklar, såsom ribosomer, proteiner och virus. Preparativ och analytisk centrifugering är de två typerna av ultracentrifugeringsmetoder. De huvudskillnad mellan preparativ och analytisk centrifugering är det preparativ centrifugering används vid pelletering av små material såsom membraner, organeller, virus, DNA och RNA medan analytisk centrifugering används för bestämning av mass och form av makromolekyler såsom proteinkomplex och graden av sedimentering av molekyler.
1. Vad är preparativ centrifugering
- Definition, fakta, användningsområden
2. Vad är analytisk centrifugering
- Definition, fakta, användningsområden
3. Vad är likheterna mellan förberedande och analytisk centrifugering
- Översikt över gemensamma funktioner
4. Vad är skillnaden mellan preparativ och analytisk centrifugering
- Jämförelse av viktiga skillnader
Nyckelord: Analytisk centrifugering, Analytiska processer, Densitetsgradient Centrifugering, Centrifug med hög hastighet, Preparativ centrifugering, Små partiklar
Preparativ centrifugering avser en höghastighetscentrifug som användes vid separation av små submikroskopiska partiklar. Det separerar små partiklar, såsom virus, viruspartiklar, proteinkomplex, proteiner, lipoproteiner, RNA och plasmid-DNA. En Beckman-Coulter preparativ centrifug med rotorns insida visas i Figur 1.
Figur 1: Beckman-Coulter Preparative Centrifuge
Den preparativa centrifugeringen kan också användas som en densitetsgradientcentrifugeringsmetod. Sackarosgradienten kan användas för att separera cellulära organeller. Cesiumgradient kan användas för att separera nukleinsyror.
Analytisk centrifugering avser en höghastighetscentrifug som används i analysprocesserna. Det används för att få information om typerna av molekyler i ett visst prov genom att känna till övergripande form, konformationsförändringar och stökiometri hos underenheterna. Det kan också användas för att bestämma sedimentationshastigheten för partiklar. En ultracentrifug visas i figur 2.
Figur 2: Beckman Coulter Optima LE-80K Ultracentrifuge
Ett optiskt detekteringssystem är försedd med den analytiska centrifugen för att övervaka spinnningen av provet i realtid. Sedimentationshastighetsexperiment och sedimenteringsjämviktsexperiment är de två huvudtyperna av experiment utförda med analytisk centrifugering.
Preparativ centrifugering: Preparativ centrifugering avser en höghastighetscentrifug som användes vid separation av små submikroskopiska partiklar.
Analytisk centrifugering: Analytisk centrifugering avser en höghastighetscentrifug som används i analysprocesserna.
Preparativ centrifugering: Preparativ centrifugering kan inte användas i analytiska förfaranden.
Analytisk centrifugering: Analytisk centrifugering används i analytiska förfaranden.
Preparativ centrifugering: Preparativ centrifugering används vid pelletering av små material, såsom membraner, organeller, virus, plasmid-DNA och RNA.
Analytisk centrifugering: Analytisk centrifugering används för att bestämma massan och formen av makromolekyler, såsom proteinkomplex och graden av sedimentering av molekyler.
Preparativ centrifugering: En stor provstorlek kan behandlas vid preparativ centrifugering.
Analytisk centrifugering: Endast små provvolymer (mindre än 1 ml) kan behandlas genom analytisk centrifugering.
Preparativ centrifugering: Mindre rena prov kan användas vid preparativ centrifugering.
Analytisk centrifugering: Relativt rena prov används i analytisk centrifugering.
Preparativ centrifugering: Preparativ centrifugering kan användas för bestämning av sedimenteringskoefficienten och molekylvikten.
Analytisk centrifugering: En exakt sedimenteringskoefficient och molekylvikt användes vid analytisk centrifugering.
Preparativ centrifugering: Fraktionerna kan samlas upp efter körningen vid preparativ centrifugering, och det finns ingen optisk avläsning under körningen.
Analytisk centrifugering: Framstegen av den analytiska centrifugeringen kan observeras visuellt under analytisk centrifugering.
Preparativ centrifugering: Inga kylarrangemang används vid preparativ centrifugering.
Analytisk centrifugering: Eftersom hög hastighet genererar mer värme, bör en kylanordning användas vid analytisk centrifugering
Preparativ centrifugering: L5-65 och L5-75 används vid preparativ centrifugering.
Analytisk centrifugering: Beckman Model E används vid analytisk centrifugering.
Preparativ och analytisk centrifugering är de två typerna av ultracentrifugeringsmetoder som använder höghastighetscentrifugering. Preparativ centrifugering används för att separera små partiklar, såsom ribosomer, plasmid-DNA och RNA. Analytisk centrifugering användes emellertid huvudsakligen för att erhålla analytiska mätningar av provet. Huvudskillnaden mellan preparativ och analytisk centrifugering är syftet med varje typ av centrifugering under provbehandling.
1. Aswathi K S, Student vid Central University of Kerala Follow. ”Ultracentrifugering.” LinkedIn SlideShare, 17 Nov. 2015, Tillgänglig här.
1. "Beckman-Coulter preparativ centrifug Avanti J25-03" Med riktigt namn: Matylda Sękpl.wiki: Cygaretkacommons: Cygaretka - Egent arbete (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons
2. "Ultracentrifuge" Av Mlw3559 på engelska Wikibooks (CC BY-SA 2.5) via Commons Wikimedia