Skillnad mellan gramfärg och syra snabbt

Huvudskillnad - Gramfärg mot syra snabbt
 

Bakterier är mycket små mikroorganismer. De är transparenta och deras upptäckt är svårt under levande och obestämda förhållanden. Således utvecklas olika färgningsmetoder för att underlätta bakteriedetektion. Det finns tre huvudtyper av färgningsteknik: enkel färgning, differentiell färgning och strukturell färgning. Differentiell färgning är en teknik som använder mer än en fläck för att skilja bakterierna. Gram fläck och syra-snabb fläck är mest populärt känd som differential fläckar. Gramfärgning är en differentiell färgningsteknik som separerar bakterier i två grupper som är kända som gram-positiva bakterier och gramnegativa bakterier. Den sura fasta fläcken är en differentiell fläck som används för att identifiera syrafasta organismer såsom Mycobacterium från icke-sura fasta organismer. Detta är nyckelfaktorn mellan Gram stain och Acid Fast stain.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är Gram Stain 
3. Vad är Acid Fast
4. Likheter mellan Gram Stain och Acid Fast
5. Jämförelse vid sida vid sida - Gramfärg mot syra snabbt i tabellform
6. Sammanfattning

Vad är Gram Stain?

Gramfärg är en viktig differentiell färgningsteknik som används för bakteriell identifiering i mikrobiologi. Denna teknik introducerades av den danska bakteriologen Hans Christian Gram 1884. Gramfärgning kategoriserar bakterier i två huvudgrupper som heter gram positiv och gramnegativ, vilket är mycket viktigt vid bakteriell klassificering och identifiering. Mikrobiologer utför gramfärgning som ett första steg i bakteriell karakterisering under studierna.

Bakterier grupperas baserat på skillnaderna i deras cellvägg. Grampositiva bakterier är sammansatta av ett tjockt peptidoglykanskikt i sin cellvägg medan gramnegativa bakterier är sammansatta av ett tunt peptidoglykanskikt i sin cellvägg. Utfallet av gramfärgningen kommer att baseras på skillnaden i tjockleken hos peptidoglykanskiktet hos cellväggen.

Gramfärgning utförs med användning av fyra olika reagenser nämligen; primär fläck, mordant, avfärgningsmedel och motfläck. Kristallviolett och safranin används som primär- och motfläckar, medan gram jod och 95% alkohol används som mordant och avfärgningsmedel, respektive. De grundläggande stegen i gramfärg är följande:

1. Ett bakteriellt smear prepareras på en ren glasskiva, värmefast och kyld.
2. Smet är översvämmade med kristallviolett i 1 - 2 minuter.
3. Smörj sköljs med långsamt rinnande kranvatten för att ta bort överflödiga fläckar.
4. Gramjod appliceras på smet i 1 minut.
5. Smörj sköljs med långsamt rinnande kranvatten
6. Smörj tvättas med 95% alkohol i 2 - 5 sekunder och sköljs med långsamt rinnande kranvatten.
7. Smörjning är motfärgad med safranin i 1 minut
8. Smörj sköljs med långsamt kranvatten, torkas och observeras under mikroskopet.

Vid slutet av gramfläcken observeras gramnegativa bakterier i rosa färg medan grams positiva bakterier kommer att observeras i lila färg.

Figur 01: Gram-negativ och Gram-positiv bakterier

Utfallet av gramfläcken bestäms av tjockleken av peptidoglykanskiktet i sin cellvägg. Under avfärgningssteget avlägsnas primär fläck och mordant lätt från de gramnegativa bakterierna och blir färglösa eftersom de har ett tunt peptidoglykanskikt. Den primära fläcken kvarhålles i de gram-positiva bakterierna eftersom de har ett tjockt peptidoglykanskikt. Räknefläcken kommer inte att vara effektiv för grampositiva bakterier på grund av retentionen av den primära fläcken. Således kommer grams positiva bakterier att synas i primär fläckfärg, det vill säga lila färg. Räknefläcken kommer att fläcka de gramnegativa bakterierna, och de kommer att vara synliga i plockfärg, vilket är safraninfärgen. Det är därför lätt att kategorisera bakterier i två grupper med gramfläck och det är värdefullt vid bakteriedifferentiering och identifiering.

Vad är Acid Fast?

Syr-snabbhet är en fysisk egenskap hos vissa bakterier, speciellt deras resistens mot avfärgning av syror under färgningsprocedurer. När de färgas, motstår dessa organismer utspädd syra och eller etanolbaserade avfärgningsförfaranden som är vanliga vid många färgningsprotokoll. Sålunda ges namnet "surt" till dessa organismer. Denna egenskap visas på grund av att ha en hög nivå av vaxartat material (mykolsyra) i sina cellväggar. Detta test är avgörande för identifieringen av Mycobacterium tuberculosis.

Figur 2: Acid Fast Mycobacteria

Denna syrafasta fläck utvecklades av Paul Ehrlich 1882. Ehrlichs sura snabbteknik modifierades av Ziehl-Neelsen och används nu oftare. Acid-snabbt färgningsförfarande innefattar tre olika reagens. Carbol fuschin används som primär fläck. Syraalkohol används som avfärgningsmedel. Metylenblå används som motfläck. Färgproceduren utförs enligt följande.

1. Den primära fläcken (carbol fuchsin) appliceras på det fasta provet på objektglaset (Alla celler kommer att färgas i röd färg).
2. Glidskyddet värms upp genom ångning i 5 minuter, vilket driver fläckarna i cellerna ordentligt.
3. Sedan tillsätts avfärgningslösningen (detta avlägsnar det röda färgämnet från alla celler utom de sura snabbbakterierna).
4. Metylenblått tillsätts som en kontrastfärg (det färgar alla avfärgade bakterieceller).
5. Syrafasta bakterier förblir röda medan icke-sura, fasta bakterier fläckar i blått.

Vad är likheterna mellan Gram Stain and Acid Fast?

• Gramfärgning och Acid-snabb är två olika färgningstekniker.
• Båda teknikerna kategoriserar bakterier i två grupper.
• Båda teknikerna använder två fläckar och en avfärgning.

Vad är skillnaden mellan gramfärg och syra snabbt?

Gram Stain vs Acid Fast
Gramfärgning är en differentiell färgningsteknik som separerar bakterier i två grupper Gram-positiva bakterier och gramnegativa bakterier.	Acid Fast fläck är en differentiell fläck som används för att identifiera syrafasta organismer från icke-sura fasta organismer.
Primärfärg
Kristallviolett är den vanligaste primära fläcken i gramfärgning.	Carbol fuchsin är den primära fläcken som används i syra snabbt.
Avfärgningsmedel
95% alkohol används som ett avfärgningsmedel i gramfläck.	Syraalkohol används som ett avfärgningsmedel i syra snabbt.
Counter Stain
Gram fläckar använder safranin som motfläcken.	Syr snabb fläck använder metylenblått som motfläcken.
Observation
Gram-negativa bakterier observeras i plockfärg och gram positiva bakterier observeras i lila färg.	Acid Snabba bakterier observeras i röd färg och icke sura bakterier observeras i blå färg.

Sammanfattning - Gram Stain vs Acid Fast

Visualisering av mikroorganismer i levande tillstånd är svårt. Därför används biologiska fläckar och färgningsförfaranden i stor utsträckning för att studera deras egenskaper. Differentiell färgning är en typ av färgningsteknik som används för att skilja bakterier. Gramfärgning och syrafast fläck är två differentiella färgningstekniker. Gramfärgning differentierar gramnegativa bakterier och grampositiva bakterier baserat på tjockleken på deras cellväggar. Acid-snabb färgning skiljer sura fasta bakterier från icke-syrafasta bakterier baserat på mykolsyrainnehållet i cellväggen. Detta är skillnaden mellan syrafast och gramfläck.

Ladda ner PDF-versionen av Gram Stain vs Acid Fast

Du kan hämta PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citationsnotat. Var god ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan Gram Stain and Acid Fast.

referenser:

1. Aryal, Sagar. "Acid-Fast Stain-Princip, procedur, tolkning och exempel." Online Microbiology Notes. NP, 08 maj 2017. Web. Tillgänglig här. 20 juli 2017.
2. Differentiella fläckar för identifiering av bakterier: Gram, Acid-Fast & Endospore. N.p., n.d. webb. Tillgänglig här. 20 juli 2017.

Image Courtesy:

1. "Lymfkörteln - Atypisk mykobakteriell infektion (MAI) - AFB-fläck" av Yala Rosen (CC BY-SA 2.0) via Flickr
2. "Gram stain 01" Av Y tambe - Y tambe s fil (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia