Skillnad mellan gramfärg och kultur

Huvudskillnad - Gramfärg mot kultur
 

Gramfärgning är en färgningsteknik som utförs för att differentiera bakterier i två grupper i enlighet med tjockleken hos peptidoglykanskiktet i deras cellvägg. Kultur är en metod för odling och bibehållande av mikroorganismer under laboratoriebetingelser för olika analyser. Den viktigaste skillnaden mellan gram fläck och kultur är deras funktion; gram stam en färgningsteknik av bakterier där odling är ett sätt att odla och bibehålla mikroorganismer.

INNEHÅLL
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är Gram Stain
3. Vad är kultur
4. Jämförelse vid sida vid sida - Gram Stain vs Culture
5. Sammanfattning

Vad är Gram Stain?

Gramfärg är en viktig differentiell färgningsteknik som används för bakteriell identifiering i mikrobiologi. Denna teknik introducerades av den danska bakteriologen Hans Christian Gram 1884. Gramfärgning kategoriserar bakterier i två huvudgrupper: gram positiv och gramnegativ; Dessa är mycket viktiga vid bakteriell klassificering och identifiering. Gramfärgning utförs som ett första steg för bakteriell karakterisering.

Bakterier grupperas baserat på skillnaderna i deras cellvägg. Gram-positiva bakterier innehåller ett tjockt peptidoglykanskikt i sin cellvägg medan gramnegativa bakterier innehåller ett tunt peptidoglykanlager i sin cellvägg såsom visas i figur 01. Resultatet av gramfärgningen kommer att baseras på tjockleksskillnaden i peptidoglykanskiktet hos cellvägg.

Figur 1: Gram-positiva bakterier och gramnegativa bakterier

Gramfärgning utförs med användning av fyra olika reagenser nämligen; primär fläck, mordant, avfärgningsmedel och motfläck. Kristallviolett och safranin fungerar som primär- och motfläckar, medan gram jod och 95% alkohol tjänar som mordant och avfärgningsmedel.

Grundläggande steg för gramfärg

1. Ett bakteriellt smear prepareras på en ren glasskiva, värmefast och kyld.
2. Smet är översvämmade med kristallviolett i 1 - 2 minuter.
3. Smörj sköljs med långsamt rinnande kranvatten för att ta bort överflödiga fläckar.
4. Gramjod appliceras på smet i 1 minut.
5. Smörj sköljs med långsamt rinnande kranvatten
6. Smörj tvättas med 95% alkohol i 2 - 5 sekunder och sköljs med långsamt rinnande kranvatten.
7. Smörjning är motfärgad med safranin i 1 minut
8. Smörj sköljs med långsamt kranvatten, torkas och observeras under mikroskopet.

Vid slutet av gramfläcken observeras gramnegativa bakterier i rosa färg medan grams positiva bakterier kommer att observeras i lila färg, såsom visas i Figur 02. Utfallet av gramfläcken bestäms av tjockleken av peptidoglykanskiktet i deras cellvägg. Under avfärgningssteget avlägsnas primär fläck och mordant lätt från de gramnegativa bakterierna och blir färglösa eftersom de har ett tunt peptidoglykanskikt. Den primära fläcken kvarhålles i de positiva bakterierna i gram, eftersom de har ett tjockt peptidoglykanskikt. Counter-fläcken kommer inte att vara effektiv för gram-positiva bakterier på grund av retentionen av den primära fläcken. Så grams positiva bakterier kommer att synas i primär fläckfärg, dvs lila färg. Counter-fläcken kommer att fläcka de gramnegativa bakterierna och kommer att synas i plockfärg vilket är safraninfärgen. Därför är det lätt att kategorisera bakterier i två grupper av gramfläcken och det är värdefullt vid bakteriedifferentiering och identifiering.

Figur 2: Gram-stam

Vad är kultur?

Mikrobiell kultur är ett sätt att odla och bibehålla mikroorganismer under laboratoriebetingelser för olika ändamål. Kulturer odlas i fast, halvfast och flytande medium baserat på typen och syftet med mikroorganismerna odling. Kulturer förses med nödvändiga näringsämnen och tillväxtbetingelser som krävs av mikroorganismerna. Det finns olika komponenter i ett odlingsmedium, såsom energikälla, kolkälla, kvävekälla, mineraler, mikronäringsämnen, vatten, stelmedel etc. Optimal temperatur, syre och pH bör justeras enligt typen av mikroorganismen som odlas.

Det finns olika typer av mikrobiella kulturer; till exempel batchkultur, kontinuerlig odling, stablingskultur, agarplattskultur, buljongodling, etc. Enligt växthusmediums sammansättning finns olika typer av odlingsmedium kända som syntetiska medier, halvsyntetiska medier och naturmedier. Mikrobiella kulturer framställs under sterila betingelser i en speciell kammare som kallas laminärt luftflöde. Växande medium och glaset steriliseras före ympningen av den önskade mikroorganismen. Under lämpliga sterila betingelser överförs målmikroorganismen till det steriliserade näringsmediet och inkuberas vid optimal temperatur. Inom mediet växer mikroorganismen och multiplicerar med hjälp av de tillförda näringsämnena.

Figur 3: En bakteriekultur på plattan

Vad är skillnaden mellan gramfärg och kultur?

Gram Stain vs Culture
Gramstammen är en differentiell färgteknik som används för bakteriedifferentiering och identifiering.	Mikrobiell kultur är ett sätt att odla mikroorganismer i laboratoriet.
Komponenter
Detta använder olika reagenser inklusive två fläckar.	Detta använder olika kulturmedier såsom fast, halvfast och flytande medium bestående av näringsämnen och andra nödvändiga betingelser.
Grundfunktioner
Detta möjliggör gruppering av bakterier i två grupper: gram negativt och gram positivt.	Detta möjliggör multiplicering av mikroorganismer för olika ändamål.
Bas
Gramfläckutfallet är baserat på skillnaderna i peptidoglykanskiktet i cellväggen.	Mikroorganismer kommer att växa och föröka sig inom kulturmedia.
Resultat
Grams negativa bakterier är synliga i rosa färg och gram positiva bakterier syns i lila färg.	På plattor kan kolonier av mikroorganismerna ses. På flytande media är mikroorganismer i suspenderad form.

Sammanfattning - Gram Stain vs Culture

Mikrobiella kulturer framställs och upprätthålls under laboratoriebetingelser för olika ändamål såsom lagring, testning, kemisk rening etc. Gramflektion är en färgprocedur som differentierar bakterier i två huvudgrupper som kallas gramnegativa bakterier och grampositiva bakterier. Därför är skillnaden mellan gramfläcken och kulturen att gramfläcken är en färgningsteknik av bakterier medan kulturen är en metod för att odla och bibehålla mikroorganismer i laboratorierna.

Referens:
1. Aryal, Sagar. "Gramfärgning: Princip, Förfarande, Tolkning, Exempel och Animation." Online Microbiology Notes. NP., 20 Sept. 2015. Web. 01 mars 2017.
2. "Mikrobiologisk kultur." Wikipedia. Wikimedia Foundation, 01 Feb. 2017. Web. 01 mars 2017
3. Kumar, Sabarish. "Vad är de grundläggande teknikerna för mikrobiell kultur?" Vilka är de grundläggande teknikerna för mikrobiell kultur? N.p., n.d. Webb. 01 mars 2017

Image Courtesy:
1. "Gram-Cell-vägg" Graevemoore inglise Vikipeediast (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Gram Stam" Av Y Tamam - Y Tamam s fil (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
3. "Anthrax Culture" av US Army Medical Research Institute of Infectious Diseases foto -  (Public Domain) via Commons Wikimedia