Vävnadsodling är en metod som används för att inducera tillväxten av celler som är separerade från organismen och odlas i olika kulturmedier. I vävnadsodling spelar kulturmedierna en viktig roll. Olika celler växer i olika kulturmedier beroende på cellerna fysiologiska och kemiska egenskaper. Monolagskultur och suspensionskultur är två huvudtyper av kulturer som används under vävnadsodlingsprocessen. En monoskiktskultur är en förankring beroende kultur där cellen växer medan den är bunden till ett substrat och suspensionskultur är en ankring oberoende kultur där cellaggregat används för att fastställa cellkulturer i flytande medier. Det här är nyckelskillnad mellan monolagskultur och suspensionskultur.
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är Monolayer Culture
3. Vad är Suspension Culture
4. Likheter mellan Monolayer och Suspension Culture
5. Jämförelse vid sida vid sida - Monolayer vs Suspension Culture i Tabular Form
6. Sammanfattning
Monolagskultur definieras som en typ av kultur, i vilken celler odlas i ett enda skikt på en kolv eller petriskål innehållande odlingsmediet. Monolagskultur hänvisas också till som vidhäftande kultur eller förankringsberoende kultur. Anledningen till att man hänvisar till vidhäftande eller förankringsberoende kultur är att dessa celler behöver ett substrat för fastsättning under deras tillväxt. De adhereras till cellkulturen som innehåller substratet.
Substraten som används i odlingsmediet bör laddas före användning. Dessa laddade substrat främjar cell till cellinteraktioner. Elektrisk jonförstärkare, divalenta katjonbeläggningar och gammastrålning är de källor som används för att ladda dessa substrat. I monolagskulturmedium regleras tillväxten, när cellerna inokuleras, med användning av processen som kallas kontaktinhibering. Under kontaktinhiberingen arresteras celltillväxten för att stoppa proliferering av normala celler när de bildat ett monoskikt fäst vid ytan.
Figur 01: Vidhäftande kultur
Cellerna som beror på andra substrat för bindning kallas vidhäftande celler. Dessa vidhäftande celler härrör ofta från organvävnader såsom njure etc. Dessa celler är immobila och är vanligtvis fästa vid bindväven. Därför bör alla dessa väsentliga tillväxtfaktorer tillhandahållas när dessa celler odlas på kulturmedier. Betydelsen av monolagskulturen är att den efterliknar de ursprungliga naturbetingelserna för att cellen ska kunna etablera sig ordentligt.
En suspensionskultur kan definieras som en typ av kultur där multiplikation av litet aggregat av celler eller enkla celler äger rum suspenderat i ett flytande medium som konstant omrörs. Med andra ord är suspensionskulturen också känd som cellodling av cellususpensionskultur. Denna kultur hjälper till vid inrättandet av encellsodlingar som kan utnyttjas vid undersökningen av växterceller med avseende på deras olika potentialer och egenskaper. Undersökning om denna aspekt kan användas för att förstå sambandet mellan celler och deras influenser när det gäller multicellulära organismer.
Under den första växtutvecklingen bildas en callus som är en massa oddifferentierade celler. Denna nivå av tillväxt orsakar hinder för identifiering av cellulära händelser under växtens tillväxt och utvecklingsfaser. Suspensionskultur infördes för att övervinna denna situation, eftersom den tillhandahöll ett utmärkt odlingsmedium för etablering av enkelcellskulturer från småcellsaggregat erhållna från callus. Detta användes för att studera olika morfologiska och biokemiska aspekter under de första stadierna av en växts utveckling.
Figur 02: Suspensionskultur
I sammanhanget med att erhålla en ideell cellodling är den typiska metoden att överföra en spröd massa av callus till ett omrört vätskeformigt medium där massan bryts och dispergeras lätt. Efteråt screenas de stora calli ut att hålla de små cellaggregaten och singeln celler. Därefter överförs dessa celler till ett annat medium. Aktivt växande celler erhålls efter två till tre veckor.
Monolayer vs Suspension Culture | |
En monoskiktskultur är en förankringsberoende kultur där cellerna odlas när de är fästa vid ett substrat. | Suspensionskulturen är en förankringsoberoende odling där multiplikation av små aggregat av celler eller enkla celler äger rum suspenderad i ett flytande medium som agiteras. |
Krav | |
Monolagskultur kräver ett vävnadskulturbehandlat kärl med periodisk passage. | Suspensionskultur kan uppnås genom behandling av icke-vävnadskulturbehandlade kärl. |
Tillväxtbegränsningar | |
Tillväxten av enskiktskultur kommer att begränsas av ytan som direkt påverkar utbytet. | Tillväxtbegränsning av suspensionskulturen sker genom koncentrationen av celler i mediet. |
Celldissociation | |
Celldissociation sker mekaniskt eller enzymatiskt i monolagskultur. | Suspensionskultur kräver inte hjälp av enzymer och mekaniska medel för celldissociation. |
Cellvisualisering | |
Monolagskultur möjliggör enkel visualisering av celler. | Det är svårare att se celler i suspensionskulturer. |
Fungera | |
Monolagskultur används inom områdena cytologi, forskning och kontinuerlig produktskörd. | Suspensionskulturen används för bulkproduktion av proteiner, forskningsstudier och satsvis skörd. |
Monolagskultur och suspensionskultur är två huvudkulturer som används i vävnadsodling. Monolagskulturen är en förankringsberoende kultur. Cellerna odlas i denna kultur där de är bundna till ett substrat närvarande i odlingen. Substraten laddas innan de används med involvering av olika källor, såsom divalenta beläggningar och jonförlängare. Suspensionskulturer är förankringsoberoende odlingar där cellerna växer utan hjälp av ett substrat för fastsättning. Denna kultur hjälper till vid inrättandet av encellsodlingar som kan utnyttjas vid undersökningen av växterceller med avseende på deras olika potentialer och egenskaper. Detta är skillnaden mellan monolagskultur och suspensionskultur.
1. "Cell Suspension Culture: Definition, Princip, Protocol and Importance" Växtvävnad. "Biologisk diskussion, 26 okt. 2015. Tillgänglig här
2. "Adherent & Suspension Cell Cultures." Study.com, Study.com. Tillgänglig här
1.Cell kultur på PNIPAM'By Guillaume Paumier (användare: guillom) - eget arbete, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2.'Sphagnum palustre i Bioreactor'By ReskiLab, (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia