Skillnad mellan transfektion och transformation

De huvudskillnad mellan transfektion och transformation är att transfektion hänför sig till införandet av främmande DNA i däggdjursceller medan transformationen hänför sig till införandet av främmande DNA i bakteriella, jäst- eller växtceller.  

Transfektion, transformation och transduktion är de tre typerna av metoder genom vilka främmande DNA införlivas i värdceller. Transfektion avser den virala vektorbaserade introduktionen av främmande DNA.  

Viktiga områden som omfattas 

1. Vad är Transfektion
     - Definition, betydelse, metoder för genöverföring
2. Vad är Transformation
     - Definition, betydelse, metoder för genöverföring
3. Vad är likheterna mellan transfektion och transformation
     - Översikt över gemensamma funktioner
4. Vad är skillnaden mellan transfektion och transformation
     - Jämförelse av viktiga skillnader

Nyckelbegrepp 

Kemiska metoder, genöverföringsmetoder, fysiska metoder, transfektion, transformation, vektorer

Vad är Transfektion 

Transfektion är processen för att artificiellt införa DNA eller RNA i däggdjursceller med andra medel än virala metoder. De flesta gånger ligeras DNA-delen av intresse i en vektor som kan vara plasmider, kosmider, BAC (bakteriella artificiella kromosomer), YACs (jästartade kromosomer) eller HACs (humana artificiella kromosomer). De vanligaste transfektionsmetoderna är kemisk medierad transfektion såsom kalciumfosfat samutfällning, liposomer och fysiska metoder såsom elektroporation, genpistolteknik och mikroinjektion.

Figur 1: Mikroinjektion av ett humant ägg

Två typer av transfektion kan identifieras baserat på hur länge det överförda DNA existerar inuti cellen. De är transienta transfektion och stabil transfektion. Vid transient transfektion finns det införda DNA-värdet inuti cellen under en begränsad tidsperiod, medan det införda DNAet kvarstår i cellen under en lång tidsperiod i den stabila transfektionen då den integreras i genomet.  

Vad är Transformation 

Transformation är den naturliga processen att ta upp främmande DNA av de behöriga cellerna i växt-, jäst-, bakterieceller. Det inducerar celler att vara kompetenta genom att skapa porer på cellmembranet genom vilket naket DNA tränger in i cellen.

Figur 2: Bakteriell transformation

De tre metoderna för genöverföring genom transformation är kemisk transformation, elektroporering och partikel bombardemang. Den allmänna transformationsmetoden är den kemiska transformationen, i vilken behandlingen av värdceller med kalciumklorid gör cellerna mer permeabla för att ta upp exogent DNA. Detta cellsteg kallas kompetenta celler. Därefter skapas porer på cellmembranet temporärt med en värmechock. Vid elektroporation görs cellerna kompetenta genom att ge en elektrisk chock. Partikel bombardemang är den allmänna metoden för att överföra DNA till växtceller där DNA-belagd guld eller volfram tvingas in i cellerna fysiskt av en genpistol.  

Likheter mellan Transfektion och Transformation 

• Transfektion och transformation är två typer av metoder som används för att introducera främmande DNA i värdceller. 
• Inledning sker genom cellmembranet och / eller cellväggen. 
• Båda förfarandena kräver naket DNA, som är renat.  
• De kan använda vektorer för att underlätta genöverföringen. 
• De tre huvudmetoderna som används vid genöverföringen är biologiska, kemiska och fysiska metoder för genöverföringen. 

Skillnad mellan transfektion och transformation 

Definition 

Transfektion är processen för att avsiktligt införa nakna eller renade nukleinsyror i eukaryota celler medan transformation hänför sig till direkt upptagning och införlivande av exogent genetiskt material från dess omgivning genom cellmembranet. 

Typ av celler 

Transfektionen introducerar främmande DNA i däggdjursceller medan transformationen introducerar främmande DNA i växt-, jäst- eller bakterieceller. 

Metod för introduktion 

Transfektion använder kalciumfosfat-samutfällning, liposomer, elektroporering, genpistolteknik och mikroinjektion för genöverföringen medan transformation använder kemisk transformation, elektroporering och partikel bombardemang. 

Slutsats 

Transfektionen är införandet av främmande DNA i däggdjursceller medan transformationen är införandet av främmande DNA i bakteriella, jäst- eller växtceller. Båda metoderna beror inte på virusmetoderna för genöverföring. Huvudskillnaden mellan transfektion och transformation är den typ av cell till vilken generna överförs.

Referens:

1. "Introduktion till transfektion." Thermo Fisher Scientific, Thermo Fisher Scientific, tillgängligt här
2. "Transfektion." Välja rätt omvänt transkriptas, tillgängligt här
3. "Vad är DNA-transformation." Molekylär Cloning Central, GenScript, tillgängligt här

Image Courtesy:

1. "Mikroinjektion av ett mänskligt ägg" Av KDS444 - Egent arbete (CC BY-SA 3.0) via Wikimedia Commons   
2. "Artificial Bacterial Transformation" Av Amunroe13 - Egent arbete (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia