Skillnad mellan in situ hybridisering och immunhistokemi

Huvudskillnad - Situation Hybridisering vs Immunohistokemi
 

Cancer- och infektionssjukdomsdiagnostik är en populär trend där nya proteomik och genomikbaserade tekniker används för att identifiera tumörer eller infektionsceller, dess proliferation och cellutvecklingsställena och analysera den genetiska grunden för de flesta överförbara och icke-smittsamma sjukdomar. Detta kommer att leda till korrekt läkemedelsbehandling och utformning och utveckling av anpassade terapier för sjukdomar. In situ hybridisering (ISH) och immunohistokemi (IHC) är två sådana allmänt använda tekniker inom cancerbiologi och nyckelfaktorn mellan in situ hybridisering och immunokemi ligger i molekylerna som används i analysproceduren. I ISH används nukleinsyraproberna i analys medan i IHC används monoklonala och polyklonala antikroppar för de diagnostiska bestämningarna.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är In situ Hybridization
3. Vad är immunohistokemi
4. Likheter mellan Hybridisering och Immunohistokemi
5. Side vid sida-jämförelse - i situ-hybridisering vs immunohistokemi i tabellform
6. Sammanfattning

Vad är In Situ Hybridization (ISH)?

In situ hybridisering är en nukleinsyrahybridiseringsteknik som utförs direkt på en del eller en sektion av vävnad, i hela vävnaden eller i celler. Tekniken beror på teorin om Watson Crick-komplementär basparning, vilket resulterar i antingen DNA-DNA-hybrider eller DNA-RNA-hybrider som kan detektera muterade gener eller identifiera den erforderliga genen av intresse. Enkelsträngade DNA-sekvenser, dubbelsträngade DNA-sekvenser, enkelsträngade RNA-sekvenser eller syntetiska oligonukleotidsekvenser användes som prober under hybridiseringsteknik och dessa prober märks med en radioaktiv fosfor vid dess 5'-ände för identifieringsförfaranden vid autoradiografi eller märkt med användning av fluorescerande färgämnen . Det finns olika typer av ISH-tekniker tillgängliga baserat på vilken typ av sond som används och vilken typ av visualiseringsteknik som följer.

Figur 01: Fluorescerande i situ-hybridisering

Det finns många tillämpningar av ISH, främst inom molekylär diagnostik av infektionssjukdomar för att identifiera förekomsten av patogener och för att bekräfta patogenen via molekylär diagnostik. Det används också inom utvecklingsbiologi, karyotyping och fylogenetisk analys och fysisk kartläggning av kromosomer..

Vad är immunohistokemi (IHC)?

I IHC-tekniken är den analyserade huvudmolekylen antigenet. Under IHC används monoklonala och polyklonala antikroppar för att bestämma närvaron av antigener vid infektion eller malign cellproliferationsstatus. Tekniken är baserad på antigen-antikroppsbindning, och enzymmärkning används för denna teknik; en sådan applikation är ELISA (Enzym-länkad immunosorbentanalys). Markörerna kan också vara fluorescerande märkta antikroppar eller radiomärkta antikroppar.

Figur 02: Immunohistokemi

IHC används ofta för att upptäcka cancerceller. Diagnostiska förfarandena riktar mot antigenerna närvarande på tumörcellerna för att identifiera och karakterisera tumören. Samma procedur är införlivad för att diagnostisera smittsamma medel. Monoklonala och polyklonala antikroppar används också för att analysera olika genprodukter genom att möjliggöra antikropp-antigenbindande reaktion mellan det önskade proteinet och den syntetiska antikroppen administrerad.

Vad är likheterna mellan in situ hybridisering och immunhistokemi?

• ISH och IHC är mycket specifika reaktioner.
• Båda teknikerna är mycket exakta.
• Båda teknikerna kan användas vid diagnostik för cancer och infektionssjukdomar.
• Dessa tekniker utförs i sterila in vitro-miljöer.
• Båda är snabba tekniker som ger reproducerbara resultat.
• ISH och IHC-användningsdetekteringsmetoder, såsom radiomärkning och fluorescenstekniker.

Vad är skillnaden mellan in situ-hybridisering och immunhistokemi?

I situ-hybridisering vs immunohistokemi
ISH är en nukleinsyrahybridiseringsteknik som utförs direkt på en del eller sektion av vävnad eller hela vävnaden.	IHC är en teknik där monoklonala och polyklonala antikroppar används för att bestämma närvaron av antigener, vilka är speciella proteinmarkörer placerade på cellytorna.
Typ av biologiska molekyler analyserad
ISH analyserar nukleinsyror.	IHC analyserar proteinantigener.
Grunden för biokemisk reaktion
Komplementär basparning mellan DNA-DNA eller DNA-RNA sker i denna teknik.	Antigen-antikroppsinteraktioner är involverade i immunhistokemi.
Enzym-länkade detekteringsmetoder
Enzymbundna detekteringsmetoder kan inte användas i ISH.	Enzymbundna detekteringsmetoder kan användas i IHC.

Sammanfattning - In situ Hybridisering vs Immunohistokemi

Molekylär diagnostik är snabba och bekräftande metoder som kan användas för att identifiera en icke-överförbar sjukdom, såsom cancer eller smittsamma sjukdomar, sådan HIV eller tuberkulos baserad på de molekylära markörer som finns närvarande på cellerna, vilket leder till manifestationen av sjukdomen. Molekylmarkörer kan vara närvarande i form av uttryckta proteiner eller på den genetiska nivån baserat på vilka olika nya tekniker som införs för att öka effektiviteten och är mindre arbetskrävande, även om det finns en hög kostnad involverad i dessa tekniker. Således beror ISH på DNA-DNA eller DNA-RNA-hybridbildning, och IHC beror på de specifika reaktionerna mellan antikropp och antigen. Detta är skillnaden mellan in situ hybridisering.

Hämta PDF-version av In Situ Hybridization vs Immunohistochemistry

Du kan hämta PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citationsnotat. Var god ladda ner PDF-versionen här Skillnaden mellan In situ Hybridisering och Immunohistokemi.

referenser:

1. Duraiyan, Jeyapradha, et al. "Applikationer av immunhistokemi." Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, Medknow Publications & Media Pvt Ltd, aug. 2012, Tillgänglig här. Åtkomst 24 aug 2017.
2. "In situ Hybridization (ISH)." National Center for Biotechnology Information, U.S. National Library of Medicine, Tillgänglig här. Åtkomst 24 aug 2017.

Image Courtesy:

1. "FISH (Fluorescent In Situ Hybridization)" Av MrMatze - Egent arbete (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia
2. "Immunohistochemicalstaining2" Av Imoen på engelska Wikipedia (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia