De flesta forskningsstudier involverar djurcellsodling och således kräver dessa studier underhåll av djurcellslinjer under speciella tillväxtbetingelser. Djurcellodling utförs i stor utsträckning i farmakologiska studier för att identifiera läkemedelsmetabolism, sjukdomsdiagnostik och cancerforskning. Cellodlingsmediet är en viktig aspekt av djurcellskultur. Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) och Roswell Park Memorial Institute Medium (RPMI) är två odlingsmedia som används vid odling av djurceller. RPMI är ett medium som används i stor utsträckning för att odla däggdjursceller i suspensionskultur. DMEM är en modifierad typ av basalt medium, med ökad aminosyra och vitaminkoncentrationer upp till en fyrfaldig. DMEM används vid odling av celler i vidhäftande kulturer. Nyckelförskjutningen mellan de två medierna är den typ av kultur i media. RPMI används i suspensionskulturer, medan DMEM används för att odla vidhäftande celler.
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är RPMI
3. Vad är DMEM
4. Likheter mellan RPMI och DMEM
5. Jämförelse vid sida vid sida - RPMI vs DMEM i tabellform
6. Sammanfattning
RPMI eller Roswell Park Memorial Institute Medium kallas också RPMI 1640. Medias namn var avledat av det institut där mediet upptäcktes. Detta medium används vanligen i djurcellskultur, speciellt för tillväxten av däggdjursceller. De var ursprungligen utvecklade för att odla mänskliga lymfocyter.
Följande ingredienser ingår i RPMI.
Den speciella egenskapen hos RPMI är den ökade koncentrationen av fosfat i mediet. RPMI används i en 5% koldioxidatmosfär. Detta kommer att ge de maximala och optimala förutsättningarna för celltillväxten. Mediet pH hålls vid 8,0 med bikarbonatbuffertsystemet.
Figur 01: Cellkultur på en petriskål
Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) är ett modifierat medium som är kommersiellt framställt. Den ursprungliga strukturen hos medelpulvret är gul. I DMEM ökar vitaminkoncentrationen upp till fyra gånger och ökar därmed näringsinnehållet i mediet.
DMEM modifieras också genom tillsats av mer salter såsom järnnitrat, natriumpyruvat och några icke-essentiella aminosyror, såsom serin och glycin. Formuleringen av glukos i media förändras också. Den ursprungliga formuleringen består av 1000 mg / 1 glukos, medan i DMEM ökas koncentrationen upp till 4500 mg / L. DMEM kräver också tillsättning av ett serummedium eftersom det inte är ett komplett medium. Oftast kompletteras DMEM med Fetal Bovine Serum (FBS). FBS ger de nödvändiga proteinerna och tillväxtfaktorerna för odlingsprocessen.
Mediet av pH varierar vid tillsats av natriumbikarbonat. pH i mediet innan tillsats av natriumbikarbonat är omkring 6,80 - 7,40, medan pH efter tillsats av natriumbikarbonat ligger i intervallet 7,60-8,20. Förvaringstemperaturen för mediet är 2-8 0C.
Figur 02: DMEM
RPMI vs DMEM | |
RPMI är ett medium som används allmänt för att odla däggdjursceller i en suspensionskultur. | DMEM är en modifierad typ av basalt medium med ökade aminosyror och vitaminkoncentrationer. |
Närvaro av extrafosfater | |
Förekommande i RPMI. | Avstående i DMEM. |
Använda sig av | |
| Används för att odla celler i vidhäftande kulturer. Det är vanligt,
|
Typer av kultur | |
RPMI används för suspensionskulturer. | DMEM används för odlingar med celladhesion. |
Både RPMI och DMEM används i stor utsträckning vid odling av djurceller, speciellt för att odla djurcellinjer innefattande lymfocyter in vitro. DMEM är ett modifierat basalt medium där det finns en ökad näringskoncentration. RPMI utvecklad av Roswell Park Memorial Institute, och det är också ett medium som användes vid odling av djurceller speciellt för däggdjurslymfocyter. Båda medierna är kommersiellt tillgängliga. Detta är skillnaden mellan RPMI och DMEM.
1. "RPMI Media - RPMI-1640 Media". Sigma-Aldrich. Tillgänglig här
2. "Dulbecco's Modified Eagle's Medium - DME, DMEM." Sigma-Aldrich. Tillgänglig här
1.Cell kultur i en liten Petri dis'By kaibara87 - ursprungligen postad till Flickr som Cell Culture, (CC BY 2.0) via Commons Wikimedia
2.'DMEM-cellodlingsmedium 'av Lilly_M - eget arbete (CC BY-SA 3.0) via Commons Wikimedia