I cellteorins sammanhang är cellerna den grundläggande strukturella och funktionella enheten hos alla levande organismer. Cellsortering är en metod som används för att separera olika celler enligt de fysiologiska och morfologiska egenskaperna. De kan vara av intracellulära eller extracellulära egenskaper. Interaktion av DNA, RNA och proteiner betraktas som intracellulära interaktiva egenskaper medan form, storlek och olika ytproteiner anses vara extracellulära egenskaper. I dagens vetenskap har cellsorteringsmetoder lett till att de olika undersökningarna i biologiska studier och även vid upprättandet av nya principer genom medicinforskning har bidragit. Cellsortering sker på olika metoder som inkluderar både primitiva med mindre utrustning och avancerade teknologiska metoder med användning av sofistikerade maskiner. Flödescytometri, fluorescerande aktiverad cellsortering (FACS), magnetcellselektion och enkelcellsortering är de huvudsakliga metoderna som används. Flödescytometri och FACS utvecklas för att differentiera celler enligt deras optiska egenskaper. FACS är en specialiserad typ av flödescytometri. Flödescytometri är en metod som används vid analys av en heterogen population av celler enligt olika cellytmolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enskilda celler. FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras enligt deras ljusspridnings- och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. Det här är nyckelskillnad mellan flödescytometri och FACS.
1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är flödescytometri
3. Vad är FACS
4. Likheter mellan flödescytometri och FACS
5. Side vid sida-jämförelse - Flödescytometri vs FACS i tabellform
6. Sammanfattning
Flödescytometri är en metod som används för att undersöka och bestämma uttrycket av intracellulära molekyler och cellytan och att definiera och karakterisera distinkta celltyper. Det används också vid bestämning av cellvolymen och cellstorleken och för att utvärdera renheten hos delpopulationer som isoleras. Detta gör det möjligt att utvärdera flera parametrar av enskilda celler vid ungefär samma tidpunkt. Flödescytometri används för att mäta intensiteten av fluorescens som produceras på grund av fluorescensmärkta antikroppar som hjälper till att identifiera proteiner eller ligander som binder till associerade celler.
Figur 01: Flödescytometri
Generellt innefattar flödescytometri huvudsakligen tre subsystem. De är vätskor, elektronik och optik. I flödescytometri finns fem huvudkomponenter tillgängliga som används vid cellsortering. De är en flödescell (en ström av vätska som används för att transportera dem och justera cellerna för optisk avkänning), ett mätsystem (kan vara av olika system inklusive kvicksilver- och xenonlampor, vattenkylda eller låga luftkylda lasrar eller diodlasrar med låg effekt), en ADC; Analog till digitalt omvandlare, förstärkningssystem och en dator för analys. Förvärvet är processen genom vilken data samlas in från proverna med hjälp av flödescytometern. Denna process förmedlas av en dator som är ansluten till flödescytometern. Programvaran som finns i datorn analyserar informationen som matas till datorn från flödescytometern. Programvaran har också förmågan att justera parametrar i experimentet som styr flödescytometern.
I samband med flödescytometri, Fluorescensaktiverad cellsortering (FACS) är en metod som används vid differentiering och sortering av ett prov av en blandning av biologiska celler. Cellerna separeras från två eller flera behållare. Sorteringsmetoden är baserad på cellens fysiska egenskaper som innefattar ljusspridning och fluorescensegenskaper hos cellen. Detta är en viktig vetenskaplig teknik som kan användas för att erhålla pålitliga kvantitativa och kvalitativa resultat av fluorescenssignaler som emitteras från varje cell. Under FACS, initialt, den för erhållna blandningen av celler; en suspension är riktade mot mitten av en smal vätskeström, som snabbt flyter. Vätskeflödet är konstruerat för att separera cellerna i suspensionen baserat på varje cells diameter. En vibrationsmekanism appliceras på suspensionens ström, vilket resulterar i bildandet av individuella droppar.
Figur 02: FACS
Systemet är kalibrerat för att skapa en enda droppe med en cell. Strax före bildandet av droppar rör sig flödesuspensionen längs en fluorescensmätningsapparat som detekterar fluorescensegenskaperna hos varje cell. Vid den bildande av droppar placeras en elektrisk laddningsring som en laddning induceras till ringen före mätningen av fluorescensintensiteten. När dropparna är bildade från suspensionsflödet fångas en laddning inuti dropparna, som sedan går in i ett elektrostatiskt avböjningssystem. Enligt laddningen avleder systemet dropparna i olika behållare. Metoden för applicering av laddningen varierar beroende på olika system som används i FACS. Utrustningen som används i FACS är känd som en fluorescensaktiverad cell sorterare.
Flödescytometri vs FACS | |
Flödescytometri är en metod som används vid analys av en heterogen population av celler enligt olika cellytmolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enskilda celler. | FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras enligt deras ljusspridnings- och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. |
Cellen är den grundläggande strukturella och funktionella enheten hos alla levande organismer. Cellsortering är processen genom vilken celler isoleras och differentieras till olika kategorier baserat på deras intracellulära och extracellulära egenskaper. Flödescytometri och FACS är två viktiga metoder inom cellsortering. Båda processerna utvecklas för att differentiera celler enligt deras optiska egenskaper. Flödescytometri är en metod som används vid analys av en heterogen population av celler enligt olika cellytmolekyler, storlek och volym som möjliggör undersökning av enskilda celler. FACS är en process genom vilken en provblandning av celler sorteras i enlighet med deras ljusspridnings- och fluorescensegenskaper i två eller flera behållare. Detta är skillnaden mellan flödescytometri och FACS.
Du kan hämta PDF-versionen av den här artikeln och använda den för offlineändamål enligt citationsnotat. Var god ladda ner PDF-version här Skillnaden mellan flödescytometri och FACS