Skillnad mellan HPLC och HPTLC

Huvudskillnad - HPLC vs HPTLC
 

Nyckelfaktorn mellan HPLC och HPTLC är det HPLC möjliggör kvantitativ separation av komponenter i ett prov medan HPTLC inte tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov.

Kromatografi är en fysisk separationsmetod som används för att separera och identifiera komponenterna i en blandning. Både HPLC och HPTLC är kromatografiska tekniker. HPLC är högprestanda vätskekromatografi. HPTLC är högpresterande tunnskiktskromatografi.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är HPLC
3. Vad är HPTLC
4. Jämförelse vid sida vid sida - HPLC vs HPTLC i tabellform
5. Sammanfattning

Vad är HPLC?

HPLC är högpresterande vätskekromatografi. Det är en analytisk teknik som används för att separera, identifiera och kvantifiera komponenter i en blandning. I denna teknik löses provet i ett lämpligt lösningsmedel. Därefter passeras lösningsmedlet med provet genom en pump med ett givet tryck. Pumpen är fylld med fast adsorbentmaterial. Sedan binder vissa komponenter starkt till det absorberande materialet medan andra komponenter binder löst. Detta medför att komponenterna har olika flödeshastigheter genom pumpen. Därför kan komponenterna lätt separeras.

Figur 01: Ett HPLC-system

Det adsorbentmaterial som fyller pumpen är känd som stationär fas. Lösningsmedlet med det upplösta provet är känt som mobilfasen. Pumpen som används i denna teknik kallas kolonnen. Kolonnen fylls med ett adsorbentmaterial, oftast kiseldioxidpartiklar. Storleken på dessa partiklar kan sträcka sig från 2-50 pm. Separationsprocessen påverkas av mobilfasens sammansättning och systemets temperatur. Samverkan mellan den stationära fasen och komponenten i provet kan vara hydrofoba interaktioner, dipol-dipol-interaktioner, jonbindning, etc.

Operativt tryck för HPLC är väsentligt högre än för traditionell vätskekromatografi. Det ligger runt 50-350 bar. Skillnaden mellan vätskekromatografi och HPLC är att vid vätskekromatografi faller provet genom kolonnen under tyngdkraften medan trycket i HPLC trycksätts genom kolonnen. Storleken på kolonnen och de absorberande partiklarna är också mycket liten jämfört med den traditionella vätskekromatografin. Emellertid är upplösningen som ges av HPLC-tekniken överlägsen.

Vad är HPTLC?

HPTLC är högpresterande tunnskiktskromatografi. Det är den avancerade och automatiserade formen av traditionell TLC. Denna teknik ger en effektiv upplösning på kort tid. I denna analysmetod kan provet och en referens analyseras samtidigt som provet kan jämföras med referensen. Det ger en förbättrad analytisk noggrannhet än andra kromatografiska tekniker. Tiden för analysen är mindre. Tekniken är en billig teknik.

Figur 02: En analys av livsmedelsfärger med användning av HPTLC

HPTLC-metoden är en enkel process, och provberedningssteget elimineras också (i traditionell TLC ingår provberedningssteget före separationen. Detta steg innefattar rengöring och berikning). Lösningsmedlet kan användas direkt utan någon förbehandling, även om andra kromatografiska tekniker kräver förbehandlingar såsom avgasning, filtrering etc.

Det adsorbentmaterial som används i HPTLC är kiseldioxid med mycket små partikelstorlekar. I traditionell TLC är partikelstorleken av kiseldioxid 5-20 pm medan i HPTLC är det 4-8 pm. Provet appliceras på HPTLC-plattan med användning av en applikator. Det ger en enhetlig och säker applikation. Därefter placeras plattorna i en kammare som har mobilfasen. Kammaren bör vara mättad med den mobila fasens ånga. Efter HPTLC-processen kan de punkter som har flyttats detekteras. Vid upptäckt av fläckar på plattan använder HPTLC-tekniken en lämplig UV-region eller en jodkammare.

Vad är skillnaden mellan HPLC och HPTLC??

HPLC vs HPTLC
HPLC är högprestanda vätskekromatografi.	HPTLC är högpresterande tunnskiktskromatografi.
Teknik
I HPLC passeras den mobila fasen med lösningsmedlet genom en kolonn fylld med den stationära fasen.	I HPTLC spottas provet på en TLC-platta och placeras inuti en kammare innehållande den mobila fasen; då får provet migrera uppåt plattan tillsammans med mobilfasen.
Mått
I HPLC används skillnaderna mellan flödeshastigheter av komponenter genom kolonnen för att separera komponenterna i provet.	I HPTLC används skillnaderna mellan avstånd som räknas av varje komponent i provet för att separera komponenterna i provet.
Kvantitativ separation
HPLC möjliggör kvantitativ separation av komponenter i ett prov.	HPTLC tillåter inte kvantitativ separation av komponenter i ett prov.

Sammanfattning - HPLC vs HPTLC

HPLC och HPTLC är två kromatografiska tekniker. Nyckelförskjutningen mellan HPLC och HPTLC är att HPLC tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov medan HPTLC inte tillåter kvantitativ separation av komponenter i ett prov.

Referens:

1. "High Performance Liquid Chromatography." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 10 april 2018, Tillgänglig här.
2. "HPTLC." LinkedIn SlideShare, 30 maj 2011, Tillgänglig här.

Image Courtesy:

1. "HPTLCplatetoMS" Av Kjaergaard på engelska Wikipedia - Överförd från en.wikipedia till Commons (Public Domain) via Commons Wikimedia
2. "Hplc" Av PD Dr. rer. nat. habil. Gertrud MorlockAssociate Professor (Privatdozentin) Universitetet i HohenheimInstitutet för matkemi - G. Morlock, C. Oellig, CAMAG Bibliography Service 103 (2009) via Commons Wikimedia