Skillnad mellan HPLC och UPLC

De nyckelskillnad mellan HPLC och UPLC är att HPLC möjliggör analys av partiklar som har sin storlek omkring 5 mikrometer medan UPLC möjliggör mycket mindre partiklar omkring 2 mikrometer.

HPLC och UPLC är båda flytande kromatografiska tekniker som är användbara vid separation av komponenterna i en förening. För att veta skillnaden mellan HPLC och UPLC behöver vi först veta vad HPLC är. Detta beror på att UPLC är en speciell version av HPLC och vi kan lätt förstå det om vi vet vilken HPLC är.

INNEHÅLL

1. Översikt och nyckelskillnad
2. Vad är HPLC
3. Vad är UPLC
4. Jämförelse vid sida vid sida - HPLC vs UPLC i tabellform
5. Sammanfattning

Vad är HPLC?

Termen HPLC står för High Performance Vätskekromatografi. Det är en teknik som vi kan använda för att skilja olika beståndsdelar i en förening. Det är också den mest använda tekniken för att identifiera, kvantifiera och separera komponenter i en blandning. Dessutom använder denna teknik ett högt tryck för att driva lösningsmedel genom kolonnen. Vidare är de stora tillämpningarna av HPLC i biokemi för analys av beståndsdelar i en förening. Det är ett idealiskt sätt att separera och identifiera aminosyror, nukleinsyror, proteiner, kolväten, bekämpningsmedel, kolhydrater, antibiotika, steroider och otaliga andra oorganiska ämnen.

Figur 01: HPLC-system i ett laboratorium

Kortfattat är förfarandet för användning av HPLC-tekniken som följer. För det första bör vi introducera provet i strömmen av mobil fas i diskreta små mängder med en pump. Pumptrycket bör bibehållas vid 40 MPa. Därefter perkolerar denna ström av mobilfas genom kolonnen HPLC. Även komponenterna i provet passerar genom kolonnen. Men deras rörelsehastigheter skiljer sig från varandra. Denna skillnad uppstår på grund av skillnaden i interaktionerna mellan provkomponenterna och adsorbenten inuti kolonnen. Vi kallar denna adsorbent som den stationära fasen eftersom den ligger inuti kolumnen (flyttar inte). För det andra kan vi i slutet av kolumnen samla provet som eluerar från kolonnen. Där kan vi bestämma skillnaderna i retentionstider för varje komponent i provet.

Vad är UPLC?

Termen UPLC står för Ultra High Performance Liquid Chromatography. Det är en variation av HPLC, men driftsättet är detsamma. I motsats till HPLC, tillåter denna metod emellertid mycket små partiklar att analyseras, såsom 2 mikrometer små partiklar.

Figur 02: En UPLC-enhet

Dessutom ger det en snabbare analys. I denna teknik använder vi ett 100 MPa pumptryck för insättning av provet i kolonnen. Därför bekräftar detta höga tryck att hela provet införs i kolonnen. Således är detta mycket effektivt jämfört med HPLC.

Vad är skillnaden mellan HPLC och UPLC?

Termen HPLC står för High Performance Liquid Chromatography medan termen UPLC står för Ultra High Performance Liquid Chromatography. Därför är UPLC-tekniken en utvecklad version av HPLC. Således är arbetsmetoden densamma för båda teknikerna. UPLC är emellertid effektivare jämfört med HPLC eftersom det använder ett högt pumptryck; pumptrycket för HPLC är 40 MPA medan det är 100 MPa för UPLC. Därför är detta en skillnad mellan HPLC och UPLC. Framför allt är nyckelskillnaden mellan HPLC och UPLC att HPLC möjliggör analys av partiklar som har sin storlek omkring 5 mikrometer medan UPLC möjliggör mycket mindre partiklar omkring 2 mikrometer.

Sammanfattning - HPLC vs UPLC

UPLC är en form av HPLC. Således är operationsmetoderna samma. Men vi kan hitta några förbättrade funktioner i UPLC jämfört med HPLC. Därför är det viss skillnad mellan HPLC och UPLC. Emellertid är nyckelskillnaden mellan HPLC och UPLC att HPLC möjliggör analys av partiklar som har sin storlek omkring 5 mikrometer medan UPLC möjliggör mycket mindre partiklar omkring 2 mikrometer.

Referens:

1. "High Performance Liquid Chromatography." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 20 oktober 2018. Tillgänglig här
2. "UPLC." Wikipedia, Wikimedia Foundation, 25 oktober 2017. Tillgänglig här  

Image Courtesy:

1. "Hplc" Av Kjaergaard på engelska Wikipedia (Public Domain) via Commons Wikimedia 
2. "Bild av en UPLC-enhet" Av Groep29 BFW - Egent arbete, (Public Domain) via Commons Wikimedia