Skillnad mellan elektrofores och elektroosmos

Elektrofores vs elektroosmos

Fysiska separationsmetoder som filtrering, destillation, kolonnkromatografi är inte enkla metoder när det kommer till separation av vissa molekyler. Elektrofores och elektro-osmos är två andra separationstekniker som kan användas för att separera laddade partiklar.

Vad är Electrophoresis?

Elektrofores är en teknik för att separera molekyler baserat på deras storlekar. Grundläggande för denna separation är molekylens laddning och deras förmåga att röra sig i ett elektriskt fält. Detta är den vanligaste och viktigaste tekniken inom molekylärbiologi att separera molekyler, speciellt DNA och proteiner. Detta används oftast eftersom det är relativt enkelt och billigt. Anordningen för elektrofores kan vara bitkomplicerad och förberedelse av det tar lite tid. Men vi kan enkelt göra en elektroforesapparat från de saker vi har i laboratoriet. Elektrofores tekniker kan variera beroende på våra syften. Vi kan använda endimensionell elektrofores för separation av DNA eller protein. Tvådimensionell elektrofores används när mer upplösta prov krävs (som vid fingeravtryck). En gel används som bärarmedium för separation av molekylerna. Denna gel kan framställas som plana plåtar eller i rör. Grunden för detta förfarande är att separera molekyler beroende på deras rörelseshastighet genom en gel när ett elektriskt fält tillhandahålls. Negativt laddade molekyler som DNA tenderar att röra sig mot den positiva polen i detta elektriska fält medan positivt laddade molekyler tenderar att resa till den negativa polen. Två typer av geler används i elektrofores som agaros och polyakrylamid. Dessa två har olika lösningsförmågor. Gelén fungerar som en sikt för att filtrera de olika storlekarna av molekyler. De elektrostatiska laddningarna som ställs in i gelén fungerar som kraften.

Separationen beror på jonernas rörlighet.

F = fv = Zee

V = ZeE / f

F = kraft som verkar på en partikel

f = friktionskoefficienten

V = genomsnittlig migreringshastighet

Z = laddning av den migrerande partikeln

e = elementär laddning

E = styrka i det elektriska fältet

De nödvändiga betingelserna för elektroforesen är relativt enkla. När man gör gelén och kör provet används en buffert. Markörer och färgämnen används för visualiseringsändamål.

Vad är elektro-osmos?

Detta är processen att flytta en vätska genom ett material som använder ett applicerat elektriskt fält. Förflyttningen kan vara genom ett poröst material, längs ett kapillärt membran etc. Detta kan användas som en separationsteknik (speciellt kapillär elektro-osmos). Vätskans hastighet är linjärt proportionell mot det applicerade elektriska fältet. Det är också beroende av materialet som används för att bygga kanalen och lösningen som används. I gränssnittet har lösning och material erhållit motsatta laddningar och detta är känt som ett elektriskt dubbelskikt. När ett elektriskt fält appliceras på lösningen rör sig det elektriska dubbelskiktet med den resulterande Coulomb-kraften. Detta är känt som det elektro-osmotiska flödet.